UOP熒光指示劑是一種檢測細胞內(nèi)鈣離子的熒光試劑。Fluo3若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當它與鈣離子Ca2+結合后熒光會增加60至80倍，是目前常用的一種鈣離子熒光探針。激光共聚焦熒光顯微鏡具有氬激光器，所以Fluo3可被廣泛使用于這種顯微鏡上。這種熒光信號發(fā)出來的長波也便于減小對樣品細胞的光損傷。Fluo3也可用來檢測紫外光照射下可裂解的熬合鈣或其它形式的鈣。Fluo3-AM是Fluo3的一種乙酰甲酯衍生物，通過培養(yǎng)，能夠輕易進入細胞中。3-AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo3，從而被滯留在細胞內(nèi)。Fluo3可以和鈣離子結合，結合鈣離子后可以產(chǎn)生較強的熒光，激發(fā)波長為506mm，發(fā)射波長為526mm。

 

　　UOP熒光指示劑作用原理：

　　在實際工作中，肉眼是難以準確地觀察出指示劑變色點顏色的微小的改變。人們目測酸堿指示劑從一種顏色變?yōu)榱硪环N顏色的過程，只能在一定的pH變化范圍內(nèi)才能發(fā)生，即只有當一種顏色相當于另一種顏色濃度的十倍時才能勉強辨認其顏色的變化。在這種顏色變化的同時，介質(zhì)氫滅菌生物指示劑的pH值則由一個值變到另一個值。

 

　　可見溶液的顏色是在從pH=pKHIn-1到 pH=pKHIn+1的范圍內(nèi)變化的，這個范圍稱為指示劑的變色范圍即變色域。在變色范圍內(nèi)，當溶液的pH值改變時，堿色成分和酸色成分的比值隨之改變，指示劑的顏色也發(fā)生改變。超出這個范圍，如pH≥pKHIn+1時，看到的只是堿色；而在pH≤pKHIn-1時，則看到的只是酸色。因此指示劑的變色范圍約2個pH單位。由于人的視覺對各種顏色的敏感程度不同，加上在變色域內(nèi)指示劑呈現(xiàn)混合色，兩種顏色互相影響觀察，所以實際觀察結果與理論值有差別，大多數(shù)指示劑的變色范圍小于2個PH單位。